Лабораторая работа №5
Анализ производных пурина
Кофеин-бензоат натрия (Coffeinum – natrii benzoas)
Вывод: препарат по своим физическим свойствам соответствует требованиям ГФ.
Подлинность:
Кофеин-бензоат натрия
УФ-спектрометрия
С общеалкалоидными осадительными реактивами. С 0,1 % раствором танина образуется белый осадок, растворимый в избытке реактива.
0,5 г препарата растворяют в 3 мл. воды, добавляют 1 мл. раствора едкого натра, 10 мл. хлороформа и взбалтывают в течении 1- 2 минут. Хлороформный слой фильтруют через фильтр с безводным сульфатом натрия и выпаривают хлороформ на водяной бане. Остаток даёт реакцию подлинности на кофеин:
К 10 мг. Препарата в фарфоровой чашке прибавляют 10 мл соляной кислоты и 0,5 мл перекиси водорода и выпаривают досуха на водяной бане. Прибавляют 1 каплю аммиака – осадок приобретает пурпурно-красную окраску, которая исчезает при добавлении 2-3 капель раствора гидроокиси натрия.
Мурексидная проба на кофеин
Реакция на бензоат. К 2 мл нейтрального раствора бензоата (0,01-0,02 г иона бензоата) прибавляют 0,2 мл раствора хлорида окисного железа; образуется осадок розовато-желтого цвета.
Соль натрия, внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в жёлтый цвет.
Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным и бесцветным
Щелочность или кислотность. 0,25 г препарата растворяют в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и прибавляют несколько капель раствора фенолфталеина. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет. Розовая окраска должна появляться от прибавления не более 0,15 мл 0,05 н. раствора едкого натра.
Органические примеси . 0,3 г препарата растворяют в 3 мл концентрированной серной кислоты. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5а.
Хлориды . 0,1 г препарата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды (не более 0,02% в препарате).
Сульфаты . 0,5 г препарата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта. Полученный раствор должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).
Тяжелые металлы. 0,5 г препарата растворяют в 10 мл воды. Полученный раствор должен выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате).
Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат при 80° до постоянного веса. Потеря в весе не должна превышать 5%.
Количественное определение кофеина-бензоата натрия по к офеину.
Около 0,1 г порошкарастворяют в 10 мл воды в мерной колбе вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл разведенной серной кислоты, 8мл 0,1 моль/лраствора йода, объем доводят водой до метки и перемешивают. После отстаивания в течение 15 мин раствор быстро фильтруют через слой ваты в сухую колбу, прикрывая воронку часовым стеклом. Первые 10мл фильтрата отбрасывают. Переносят 25 мл фильтрата в колбу и избыток йодаоттитровывают0,1 моль /л растворомнатрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор - крахмал).
Параллельно проводят контрольный опыт, титруя раствор йода после фильтрования (А мл).
1 мл 0,1 моль/л раствора йода соответствует 0,004855 г безводного кофеина. Содержание кофеина-бензоата натрия (X) в граммах вычисляют по формуле:
где Р - средняя масса порошка, г; 2,564 - коэффициент пересчета на кофеин-бензоат натрия при содержании 38 - 40% кофеина в препарате.
Метод йодометрии. Основан на образовании осадка перйодида кофеина в кислой среде, который отфильтровывают и в фильтрате определяют избыток йода.
Дана ЛФ:
Кофеина-бензоата натрия 0,05 г
Сахара 0,1 г
Заключение:
Хранение: бывший список Б, в хорошо укупоренной таре.
Применение: стимулятор ЦНС, кардиотоническое средство.
Реакции подлинности на Бензоат
Качественная реакция на катион натрия
Натрий окрашивает бесцветное пламя горелки в желтый цвет.
Задача №7
Для производства «Горькой настойки» предприятием закуплена партия ЛРС «Лист вахты трехлистной» массой 2160 кг (нетто), упакованные в тюки из ткани массой 40 кг (нетто). На трех тюках обнаружены следы подтеков. Для подтверждения качества сырья были отобраны пробы и проведен их анализ.
· Какой нормативной документацией руководствуются при проведении приемки и испытании проб?
· Рассчитайте объем выборки.
· Как определяются массы средней и аналитической проб? Что такое метод квартования?
ЛИСТЬЯ ВАХТЫ ТРЕХЛИСТНОЙ - FOLIA MENYANTHIDIS TRIFOLIATAE
Вахта трехлистная - Menyanthestrifoliata
Семейство вахтовые – Menyanthaceae
Заключение о качестве сырья:
По ГФ XI– числовые показатели для цельного сырья: суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 1%; влажность не более 14%; золы общей не более 10%; пожелтевших, почерневших и побуревших листьев не более 5%.
При проведении приемки и испытаний проб руководствуются ОФС 420013-03 «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб», а анализ проб проводят согласно Государственной фармакопеи XIиздания.
Объем выборки рассчитывают для неповрежденных единиц продукции, а три тюка со следами подтеков вскрывают, и отдельно анализируют.
Объем выборки рассчитывают по таблице №1.
2160 / 40 = 54 (тюка) объем выборки составляет 10% от транспортных единиц партии, т.е. 6 тюков.
Из каждой вскрытой единицы продукции берут по 3 точечной пробы одинаковые по массе, смешивают их и получают объединенную пробу, из которой методом квартования берут среднюю пробу массой согласно таблице №2 (400,0), которые упаковывают и отправляют в центр по контролю и сертификации лекарств, там её методом квартования делят на 3 аналитические пробы:
по первой (массой 200,0) определяют подлинность, измельченность и содержание примесей;
по второй (массой 25,0) определяют влажность;
по третьей (массой 150,0) определяют зольность и действующие вещества.
Государственная Фармакопея требует определить в листьях трилистника сумму флавоноидов в пересчете на рутин (согласно Государственной фармакопеи XIиздания не менее 1%).
В ОТК фармацевтического предприятия для изготовления таблеток поступило для оценки качества субстанция «Рутин» нескольких серий. В одной серии показания оптической плотности при определении примеси кверцетина превысили регламентируемую норму.
· Обоснуйте причины изменения содержания примеси.
· Приведите химическую формулу этого вещества, его латинское и рациональное названия.
· Перечислите его физико - химические свойства и нормативные показатели, обусловленные этими свойствами.
· Предложите методы качественного и количественного определения рутина, напишите уравнения реакции.
Rutinum – Рутин
З-Рутинозид кверцетина; 3-рамногликозил-3,5,7,3",4"-пентаоксифлавон
В составе рутина присутствуют химические группы: По химическому строению рутозид является гликозидом. Сахарная часть (дисахарид рутиноза) включаетD-глюкозу иL-рамнозу.Агликон - кверцетин,относится к флаваноидам, содержащимядро хромана (дигидробензпирана) кверцетин
1. фенольные гидроксилы.
Описание. Зеленовато-желтый мелкокристаллический порошок без запаха и вкуса. Растворимость. Практически нерастворим в воде, мало растворим в 95% спирте, трудно растворим в кипящем спирте, практически нерастворим в растворах кислот, в эфире,
Анализ Рутина. 1. ИК-спектр должен полностью совпадать со спектром стандарта. 2. УФ-спектр 0,002% раствор препарата в абсолютном спирте имеет max при 259, и 362,5 нм. За счет ароматической системы кверцетина.
Химические реакции: 1)происходит годролиз гликозидной связи, а затем цветная реакция с раствором гидроксида натрия (желто-оранжевое окрашивание), окраска обусловлена превращением флавоноида в халкон с раскрытием пиранового цикла.
2) Цианиновая реакция происходит при действии на рутин порошком магния и конц. соляной кислоты в спиртовой среде. основана на образовании окрашенных пирилиевых солей при восстановлении водородом флавоноидов, в том числе рутина
3) сахарная часть (глюкоза) опр-ся с реакт. Фелинга после гидролиза.
Количественное определение: Метод –УФ-спектрофотометрия.
Определяют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длинах волн 375 нм (D1) и 362,5 нм (D2) в кювете с толщиной слоя 1 см. Если отношение D1/D2 находится в пределах 0,875±0,004, то содержание рутина в процентах (X) вычисляют по формуле:
где 325,5 - удельный показатель поглощения Е\%см чистого рутина (безводного) в абсолютном спирте при длине волны 362,5 нм; а - навеска в граммах. Если отношение D1/D2 превышает 0,879, то содержание рутина в процентах (X) вычисляют по формуле:
3.В условиях аптеки:
· Обоснуйте правила введения спиртосодержащих лекарственных средств при изготовлении жидких лекарственных форм для внутреннего и наружного применения.
При изготовлении ЖЛФ часто вводятся спиртосодержащие ЛФ (настойки, жидкие экстракты, эликсиры, новогаленовые (максимально очищенные препараты) спиртовые растворы). Следует руководствоваться положением приказа МЗ и соц. Развития России №308 от 21.10.97:
Спиртовые растворы готовятся массо-объемным способом;
Если в прописи рецепта без указания концентрации выписан раствор; предусмотренный в НД несколькими концентрациями ЛВ, отпускать следует раствор слабой концентрации (например, раствор борной кислоты 0,5%, 1%, 2%, 3%, 5% - отпускать 1% раствор, р-р йода 1%, бриллиантового зеленого 1% и т.д.)
Норма отпуска спирта учетной концентрации в пересчете на массу составляет 50,0, в случае указания по специальному назначению – не более 100,0.
В сложные микстуры, спиртосодержащие жидкости следует добавлять по возрастанию крепости спирта во избежание образования осадка ДВ.
Спирт при изготовлении экстемпоральных препаратов отмеривают по объему, а учитывают по массе в пересчете на 95 – 96%.
Бланк рецепта №148, спирт находится на ПКУ.
4.Акцентируйте внимание на организационно-экономических аспектах:
· Какой порядок ценообразования, отпуска из аптеки и учета этилового спирта, спиртосодержащих лекарственных форм и спиртовых настоек заводского изготовления?
Natrii benzoas
C 7 H 5 NaО 2 М. м. 144,11
Описание. Белый кристаллический или аморфный порошок без запаха или с очень слабым запахом.
Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 90 %, практически нерастворим в эфире и хлороформе (ГФ XI, вып.1, с.175).
Подлинность. Ультрафиолетовый спектр 0,001% водного раствора препарата в области от 220 до 300 нм имеет максимум поглощения при 226 нм ± 2 нм.
0,2 г препарата в 2 мл воды дают характерную реакцию на бензоаты (ГФ XI, вып. 1, с. 159).
Прозрачность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталонным раствором 1 (ГФ XI, вып. 1, с. 198).
Цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть бесцветным (ГФ XI, вып.1, с. 194).
Щелочность и кислотность. К раствору, полученному в испытании на “Прозрачность“, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина. Окраска раствора должна измениться от прибавления не более 0,2 мл 0,1 М раствора натра едкого или 0,2 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной.
Хлориды. 0,1 г препарата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 95%. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды (не более 0,02% в препарате; ГФ XI, вып. 1, с. 165).
Сульфаты. 0,5 г препарата растворяют в 4,5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 95% и 0,5 мл кислоты хлористоводородной разведенной. Полученный раствор должен выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате; ГФ XI, вып. 1, с. 165).
Тяжелые металлы. 0,5 г препарата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 95 %. Полученный раствор должен выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в препарате;ГФ XI, вып. 1, с. 165).
Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 2,0 % (ГФ XI, вып. 1, с. 176).
Количественное определение. Около 1,5 г препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл воды в колбе с притертой пробкой, вместимостью 250 мл, прибавляют 45 мл эфира, 0,2 мл индикатора и титруют 0,5 М раствором кислоты хлористоводородной до появления сиреневой окраски в водном слое. В конце титрования содержимое колбы хорошо встряхивают.
1 мл 0,5 М раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,07205 г С 7 H 5 NaO 2 . Препарат содержит не менее 99,0 % г С 7 H 5 NaO 2 в пересчете на сухое вещество.
Примечание. Приготовление индикатора. 1 мл 0,1 % раствора метилового оранжевого смешивают с 1 мл 0,15% раствора метиленового голубого. Раствор применяется свежеприготовленным.
Хранение. В сухом, защищенном от света месте, при температуре выше + 25 0 С.
Контрольные вопросы и ситуационные задачи.
1. Объяснить с электронной точки зрения кислые свойства фенолов.
2. Какова область применения в фармацевтическом анализе реакций электрофильного замещения фенолов? Привести примеры.
3. Одним из химических свойств фенолов является их хорошая окисляемость с последующей конденсацией исходных и образовавшихся продуктов. Привести примеры реакций данного типа с хлорамином или хлорной известью на примере фенола, с реактивом Марки (формальдегид с концентрированной серной кислотой) на примере резорцина.
4. Приведите уравнения реакций сочетания фенолов с солью диазония в щелочной среде на примере фенола и резорцина.
5. Из реакций замещения в фармацевтическом анализе используется способность фенолов бромироваться и нитроваться. Какие продукты при этом получаются? Как эти реакции можно использовать для подтвержения подлинности производных фенола? Привести уравнения реакций на примере синестрола (бромирование) и фенола (нитрование).
6. Продукт нитрования фенола используется в фармацевтической химии как реактив. Написать его формулу, привести химическое и тривиальное названия, а так же реакцию, в которой он выступает в качестве реагента.
7. Одной из общих реакций идентификации на фенольный гидроксил является реакция с хлорным железом. Назовите тип реакции. Какие из перечисленных веществ не дают этой реакции: фенол, ментол, резорцин, тимол.
8. ГФ Х для испытания подлинности резорцина рекомендует реакцию образования флюоресцина. Напишите уравнение реакции, назовите ее тип и стадии.
9. Обоснуйте йодо- и йодохлорметрические методы анализа резорцина, Чему будет равен фактор эквивалентности препарата.
10. Какие химические свойства викасола используются в цериметрическом и йодометрическом методах количественного определения.
11. Химические свойства ароматических кислот и их солей.
12. Способы получения ароматических кислот и их производных.
13. Общие и частные методы идентификации препаратов данной группы.
14. Общие и частные методы количественного определения.
15. Условия хранения препарата в зависимости от химического состава.
16. Обоснуйте фармакопейный метод количественного определения натрия бензоата. С какой целью определение ведётся в присутствии эфира. Приведите уравнения, выведите фактор эквивалентности.
17. Количественный анализ натрия бензоата по фармакопейной методике проводят ацидиметрическим методом вытеснения. Рассчитайте титр, если в качестве титрованного раствора будет использован раствор хлороводородной кислоты (0,5 моль/л).
18. Сделайте заключение о качестве тимола, если по методике ГФ на титрование навески 0,1501 г израсходовалось 13,0 мл раствора калия бромата (0,1 моль/л, УЧ 1/6 KBrO 3).
19. Рассчитайте массу порошка растертых таблеток викасола, чтобы на титрование по методике ГФ израсходовалось 22,5 мл раствора церия (IV) сульфата (0,1 моль/л, УЧ 1/2 Ce(SO 4) 2). Средняя масса таблетки 0,1014 г.
20. Какую навеску резорцина следует взять, чтобы при определении йодхлорметрическим методом на обратное титрование выделившегося йода пошло 10 мл натрия тиосульфата (0,1 моль/л), объем йода монохлорида был 30 мл (0,1 моль/л, УЧ ½ ICl).
Список литературы для подготовки.
1. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: Учеб. Для вузов. – Пятигорск, 2003. С. 258-266.
2. Фармацевтическая химия: Учеб. Пособие / Под ред. А.П. Арзамасцева. – 2-е изд., испр. – М.: ГОЭТАР-Медиа, 2005.
3. Химический анализ лекарственных веществ по функциональным группам. Учебно-методическое пособие для студентов фармацевтического факультета. – Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2003.
4. Органические лекарственные препараты. Ароматические соединения. Краткий конспект лекций. – Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской медицинской академии, 2004.
Подлинность.
Кофеин-бензоат натрия
Coffeinum natrio-benzoicum
Получение. Взаимодействие водных растворов бензоата натрия и кофеина, полученный раствор выпаривают до образования сухого порошка.
1. реакции на кофеин после выделения щелочью и хлороформом.
2. реакция на бензоат ион с трихлоридом железа образуется осадок телесного цвета.
3. препарат дает реакции, характерные для иона натрия.
1. определение кофеина йодометрическим методом после осаждения его из препарата кислотой в виде основания кофеина, содержание кофеина должно быть 38 - 40% в пересчете на сухое вещество.
Точную навеску препарата растворяют в воде, прибавляют разбавленную серную кислоту и 0,1 М раствор йода, после отстаивания в течение 15 минут раствор фильтруют и в фильтрате избыток йода оттитровывают 0,1 М раствором тиосульфата натрия, в конце титрования прибавляют раствор крахмала.
I 2 + 2Na 2 S 2 O 3 = 2NaI + Na 2 S 4 O 6
УЧ=1/4; формула обратного титрования
2. В другой навеске определяют количество бензоата натрия методом нейтрализации. Титрование ведут в присутствии эфира, который извлекает выделяющуюся бензойную кислоту.
Точную навеску препарата растворяют в воде, прибавляют эфир, смешанный индикатор (метиловый оранжевый и метиленовый синий) и титруют 0,5 М раствором соляной кислоты до появления сиреневой окраски водного слоя
Бензоата натрия должно быть 58 - 62%.
Хранение. в хорошо укупоренной таре.
Применение. Стимулятор ЦНС, кардиотоническое средство.
Формы выпуска. Растворы для инъекций 10, 20%-ный, таблетки 0,1; 0,2.
См. Учебно-методическое пособие по внутриаптечному контролю: концентрированный раствор кофеина-натрия бензоата 10%; растворы для внутреннего применения - раствор натрия бромида и кофеин-натрия бензоата; настой травы горицвета, кофеин-натрия бензоата и натрия бромида; внутриаптечная заготовка и фасовка (микстура) состава: настой корневищ и корней валерианы, кофеин-натрия бензоат, магния сульфат, натрия бромид, настойка мяты перечной.
Натрия бензоат , бензойнокислый натрий .
Химические свойства
Бензоат Натрия, что это такое? Натриевая соль бензойной кислоты, широко используемый консервант. Представляет собой белый мелкий порошок, без запаха или с едва уловимым запахом бензальдегида . Химическая формула: C6H5CO2Na . Согласно фармакопее, молекулярная масса соединения = 144,1 грамм на моль. Вещество было открыто в 75 году 19 века в качестве заменителя . Средство стали применять в качестве консерванта с начала 20 века. В небольших дозах вещество содержится в клюкве, яблоках, горчице и корице.
Средство применяют:
- в качестве пищевой добавки E102 , E110 , E124 , E104 , E122 и E129 ;
- в виде консерванта в фармацевтической и косметической промышленности;
- в медицине, как отхаркивающее средство;
- в пиротехнике и авиации для создания специальной бумаги, защищающей детали из алюминия и с гальваническим покрытием.
Вред Бензоата Натрия
На данный момент вопрос о том, вреден ли данный компонент, остается открытым. Так как в разных продуктах питания часто присутствуют молочная кислота, красители и стабилизаторы, сорбат калия и Бензоат Натрия. Вещество разрешено к использованию в странах СНГ и Европы. Его добавляют в майонез, рыбные изделия, кетчуп и маргарин, сладкие газированные напитки, джемы и ягодные продукты. Однако существует ряд научных работ, которые говорят о вреде консерванта, о его способности вызывать сильный окислительный стресс, о мутагенной активности по отношению к митохондриальной ДНК. Молекулярный биолог Peter W. Piper считает, что вещество может вызывать различные нейродегенеративные заболевания и . Согласно рекомендациям ВОЗ, вещество принято считать относительно безвредным. В редких случаях химическое соединение вызывает , обострение симптомов и .
Фармакологическое действие
Отхаркивающее.
Фармакодинамика и фармакокинетика
Что такое Бензоат Натрия? Влияние бензоата натрия на организм
В достаточно больших концентрациях лекарственное средство оказывает угнетающее действие на жизнедеятельность плесневых и дрожжевых грибов, подавляет активность ферментов, ответственных за протекание ОРВ, расщепляющих крахмал и жиры. При приеме внутрь вещество стимулирует процессы выделения слизи, увеличивает мукоцилиарный клиренс.
Показания к применению
Средство назначают при комплексном лечении воспалительных заболеваний дыхательных путей, которые сопровождаются , трахеита , .
Противопоказания
Средство противопоказано к приему при на активный компонент.
Побочные действия
Очень редко Бензоат Натрия может вызвать аллергические реакции, высыпания на коже.
Инструкция по применению (Способ и дозировка)
Препараты с добавлением данного вещества назначают внутрь.
В зависимости от возраста и вида кашля используют разные дозировки и лекарственные формы. Курс лечения в среднем составляет от 10 дней до 2 недель.
Передозировка
Сведения о передозировке препаратом ограничены.
Взаимодействие
Нет данных о лекарственном взаимодействии средства.
Условия продажи
Безрецептурный отпуск.
Особые указания
Бензоат Натрия следует использовать в соответствии с рекомендациями, описанными в инструкции к тому или иному препарату. Не принимать по истечению срока годности.
При беременности и лактации
Вещество можно принимать и кормящим женщинам по показаниям врача. Если потенциальная польза превышает риск для здоровья ребенка.
Препараты, в которых содержится (Аналоги)
Вещество в комбинации с , семенами аниса, экстрактом термопсиса и солодки входит в состав . Также средство содержится в препаратах: Амтерсол , Микстура от кашля для детей сухая , Манисофт , Тос-Май , Экстратерм .